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非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero)

非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero)

產(chǎn)品時(shí)間:2019-04-11

簡要描述:

非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero)公司一直腳踏實(shí)地,深耕市場,洞察廣大消費(fèi)者的需求,為消費(fèi)者提供高品質(zhì)產(chǎn)品而努力,一切從客戶需求出發(fā),為客戶需求打造專業(yè)的細(xì)胞產(chǎn)品,是我司能一直跑在市場前沿的秘訣所在,為回饋客戶,特展開8折優(yōu)惠溫暖沖擊波活動,盡情享受吧!

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非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero)
細(xì)胞介紹
Vero細(xì)胞株是日本千葉大學(xué)的Y. Yasumura和Y. Kawakita從正常成年非洲綠猴的腎臟建株的。1964年6月15日B. Simizu將其從千葉大學(xué)帶到國立健康研究所(NIH)國立過敏及傳染病研究所熱帶病毒實(shí)驗(yàn)室時(shí),己傳至第93代。
 
細(xì)胞特性
1)來源:非洲綠猴正常腎
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長
3)含量:>lxl06 個(gè)/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
 
運(yùn)輸和保存:使用T25瓶充液發(fā)送活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,請先在顯微鏡下檢查細(xì)胞生長狀態(tài),并將T25瓶置于培養(yǎng)箱約6h或過夜后,再次檢查細(xì)胞狀態(tài)。若狀態(tài)良好,可進(jìn)行細(xì)胞后續(xù)處理操作,按照以下方式進(jìn)行。若發(fā)現(xiàn)可疑污染物,請及時(shí)與我們?nèi)〉秒娐?lián)。
細(xì)胞用途:僅供使用。

非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero)細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備 DMEM-H 培養(yǎng)基(DMEM-H,GIBCO,添加 NaHC031.5g/L),90%;胎牛血清,10%。(DMEM 液體培養(yǎng)基:GIBCO,11995-065)。
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細(xì)胞處理:
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢
查細(xì)胞密度。
 
細(xì)胞傳代:
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分
鐘,棄去上清液,補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 
細(xì)胞凍存:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約lml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加1〇%DMSO后進(jìn)行凍存。
 
非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero)注意事項(xiàng):
收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們電聯(lián)。
所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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